【肺癌前沿】韩宝惠教授：血浆标本进行ARMS法EGFR突变检测的可行性及准确性评价

“血浆标本ARMS法检测EGFR突变相对敏感且高度特异。血浆EGFR突变检测更适合III–IV期的NSCLC患者，尤其是那些因为病情严重而无法进行活检或其他不适合活检的患者。”

肺癌是全球肿瘤致死最常见的病因，其中非小细胞肺癌（NSCLC）的发生率约85%，且70%以上患者初诊时就已不可接受手术治疗。因此分子靶向治疗，在NSCLC临床管理中尤为重要。EGFR突变对EGFR-TKIs疗效的预测作用使其定义了NSCLC一种分子亚型，NSCLC患者治疗前应进行EGFR检测。然而手术标本无法满足多数NSCLC患者，其他如活检小标本或细胞学标本来源的DNA为EGFR检测提供了一种有限的、潜在的质量较低的标本。为了解决这一问题，寻找其他DNA来源，如血液、血清、血浆等含有ctDNA或CTC的样本，已成为肿瘤基因分型的新策略。此前ARMS法已经被广泛应用于多个大型临床试验并成为肿瘤组织EGFR突变检测可靠、高敏感、高特异的方法，可检出样本中含量低至1%的突变。去年上海胸科医院韩宝惠教授团队发表在《Gene》上的研究结果对血浆标本进行ARMS法EGFR突变检测的可行性及准确性做出了评价。

EGFR突变状态在组织和血浆样本中的相关性

该研究共收集219例未经治疗或术后转移/复发且未经TKI治疗的III-IV期NSCLC患者的组织与血浆配对标本，分别提取DNA（AmoyDx®FFPE DNA Kit/AmoyDx® plasma/serum DNA Kit）后采用ARMS法（AmoyDx®EGFR Gene mutation Diagnostic kit）进行EGFR突变检测。血浆与组织标本的总体一致率为82%（179/219），敏感性60%（54/90），特异性97%（125/129），阳性预测值93%（54/58），阴性预测值79%（125/161）。

考虑到疾病分期对游离DNA释放到外周血可能存在的影响，研究根据不同分期对两种标本的检测一致率分别进行了比较：III期患者组织和血浆检测的敏感性、特异性和一致率分别为50%、100%和81.3%，而IV期患者分别为60%、90%和81%。该研究还根据患者临床特征进行了亚组分析。随着转移灶数量增加，血浆样本的检测敏感性也随之增长。有些研究显示血浆中ctDNA浓度与转移灶数量显著相关。转移肿瘤越多可能会有更多的DNA释放到血液中，从而导致肿瘤来源的DNA水平升高。这也解释了为什么IV期患者的检测敏感性高于III期患者。此外，无论组织还是血浆标本中EGFR突变在女性、不吸烟和腺癌患者中的发生率均更高，这一结果与IPASS等研究结果一致。

组织及血浆中EGFR突变状态与生存结果的相关性

截至2015年10月30日，198人疾病进展，150人死亡，中位随访时间18.9个月（0.46-39.5月）。在单变量分析中，EGFR突变人群的mOS比EGFR无突变人群更长，无论组织（23.98月 vs. 12.16月；P< 0.001）或ctDNA（19.96月 vs. 13.63月；P = 0.009）。多变量分析中，组织亚型、肿瘤组织EGFR突变状态、EGFR-TKIs一线治疗以及转移灶数量均与较长的OS相关。

结论

 血浆样本ARMS法检测EGFR突变相对敏感且高度特异。血浆EGFR突变检测更适合III-IV期的NSCLC，尤其是那些因为病情严重而无法进行活检或其他不适合活检的患者。